樣品準備
按照GB5009.229,預估樣品酸價1-3mg/g,樣品秤取10.00g,放于研缽中,研碎。特別注意,樣品的提取,一定要參照GB5009.229進行。
折疊濾紙筒:取一張正方形濾紙,按照“索式提取器”的直徑對折(高于虹吸管,低于蒸汽上升管),折疊好以后,用大拇指將濾紙筒底部向內折疊形成“底”,用玻璃棒從內部將折疊好的“底”撥平整,注意,濾紙筒一定要緊密,而且濾紙筒的高度不能超過回流彎管,否則溶劑不易穿透樣品。
用不銹鋼稱量勺將研碎的樣品裝入折疊好的濾紙筒中,再將裝有樣品的濾紙筒裝入索式提取器中;3.2.4試劑石油醚(沸程30 ℃~6o ℃) 200ml倒入廣口瓶備用。
索式脂肪提取器-上海那艾
圓底燒瓶放于電熱套中,或置于可控溫電爐上,用鐵架臺鐵夾夾住圓底燒瓶口部加以固定,加藥品:取一個50ml 量筒,左手握一根玻璃棒,將棒體伸入量筒內,右手握石油醚(沸程30 ℃~6o ℃)廣口瓶,廣口瓶沿玻璃棒緩緩倒入量筒中,記錄用量;再用量筒將石油醚(沸程30 ℃~60 ℃)倒入圓底燒瓶2/3處。
將裝有樣品的索氏提取器放于圓底燒瓶上,用鐵架夾固定。
連接冷凝器水管:按照低進,高出的原則,進水口使用橡膠軟管一頭與水管相連,一頭與冷凝器連接;出水口用橡膠軟管連接,另一頭伸進水池中。
水管連接好以后,將冷凝器放入索氏提取器上,用鐵架夾子夾緊。
打開水管,將水注入冷凝器中,水從排水口流出。
冷凝管上端最好連接一個氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進入,而且還可以避免乙醚揮發在空氣中,這樣可防止實驗室微小環境空氣的污染。如無此裝置,塞一團干脫脂棉球亦可。
提取
打開圓底燒瓶下方的電熱爐,加熱到70-80℃提取2小時,觀察提取液色澤變化,由深變淺,虹吸5次左右可停止加熱。
提取原理:提取瓶內加入石油醚,加熱提取瓶,石油醚氣化,由連接管上升進入冷凝器,凝成液體滴入提取管內,浸提樣品中的脂類物質。待提取管內石油醚液面達到一定高度,溶有粗脂肪的石油醚經虹吸管流入提取瓶。流入提取瓶內的石油醚繼續被加熱氣化、上升、冷凝,滴入提取管內,如此循環往復,直到抽提完全為止。
油脂提取
對脂肪進行充分抽提后,就可以對樣品及醚提出物進行烘干或者對溶劑杯進行烘干。烘干時間不宜過長,因為一些不飽和脂肪酸,容易在加熱過程中被氧化而影響脂肪測定的最終結果。在沒有真空干燥箱的條件下,可以在100-105℃下干燥1.5-3小時(也可以用電熱爐加熱加速試劑蒸發)。
清洗
提取完成后,待設備冷卻后用清水洗凈,放于烘干箱中烘干,以備下次使用。